分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器力量。常用于核酸自動化方案，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量堅持好。儀器主要由光源、單色器、樣品室合理需求、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成充分發揮。
一高質量、分光光度計原理
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置選擇適用，從而產(chǎn)生特定波長的光源管理，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收業務指導，計算樣品的吸光值改進措施，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比長足發展。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時今年，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關(guān)系為:A=-lg(I/I實施體系。)=-lgT=kLc 式中:A 為吸光度;I組建。為入射的單色光強度;I 為透射的單色光強度;T 為物質(zhì)的透射率;k 為摩爾吸收系數(shù);L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長;c為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長效果較好，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)重要的意義。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量等多個領域。在可見光區(qū)再獲，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析提供了有力支撐。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多激發創作，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應(yīng)用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作進一步意見。
二增幅最大、分光光度計使用方法步驟
1)預(yù)熱儀器。為使測定穩(wěn)定生產能力，將電源開關(guān)打開標準，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞堅持好，不要連續(xù)光照即將展開。預(yù)熱儀器時和在不測定時應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷特性。
2)選定波長傳承。根據(jù)要求等特點，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長多種。
3)固定靈敏度檔將進一步。根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7發展成就，選擇合適的靈敏度成就。為此，旋動靈敏度檔開展面對面，使其固定于某一檔系統，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔進一步提升。
4)調(diào)節(jié)“0”點快速融入。輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時系統，比色皿暗箱蓋是打開的意料之外，光路被切斷，光電管不受光照)形式。
5)調(diào)節(jié)T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的*格內(nèi)不斷完善，有色溶液放在其它格內(nèi)數字化，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器基礎上，使透光度T=100%各領域，即表頭指針恰好指在T=100%處。
6)測定保持競爭優勢。輕輕拉動比色皿座架拉桿進行培訓，使有色溶液進入光路，此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A長效機製。讀數(shù)后法治力量，打開比色皿暗箱蓋。
7)關(guān)機分享。實驗完畢共享，切斷電源，將比色皿取出洗凈方式之一，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈生動。
三、分光光度計操作使用過程中的注意事項
1)為了防止光電管疲勞創新能力。不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開新品技，使光路切斷範圍，以延長光電管使用壽命。
2)比色皿的使用方法：
〖檶嵶?、倌帽壬髸r空間廣闊，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污雙重提升。
②清洗比色皿時品牌，一般先用水沖洗深入開展，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機物沾污等形式，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1∶2)浸泡片刻技術的開發，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿飛躍，以免損壞更高效。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面重要部署。
每次做完實驗時具體而言，應(yīng)立即洗凈比色皿。
≈腔叟c合力、郾壬笸獗诘乃貌羚R紙或細軟的吸水紙吸干喜愛，以保護透光面。
￠_放要求、軠y定有色溶液吸光度時向好態勢，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度服務機製。另外貢獻力量，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定大幅拓展，以減小測量誤差發行速度。
⑤在實際分析工作中與時俱進，通常根據(jù)溶液濃度的不同奮勇向前，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7實施體系。
四組建、分光光度計分操作中容易出現(xiàn)的幾個典型故障及其排除方法
1）儀器不能調(diào)零⌒Ч^好？赡茉?
①光門不能*關(guān)閉重要的意義。解決方法:修復(fù)光門部件持續，使其*關(guān)閉。
②透過率"100%"旋到底了再獲。解決方法:重新調(diào)整"100%"旋鈕產品和服務。
③儀器嚴重受潮。解決方法:可打開光電管暗盒擴大，用電吹風吹上一會兒使其干燥多樣性，并更換干燥劑。
④電路故障新格局。解決方法:送修理部門明顯，檢修電路。
2)儀器不能調(diào)"100%"顯示撔聻橄?？赡茉?
①光能量不夠。解決方法:增加靈敏度倍率檔位科普活動，或更換光源燈(盡管燈還亮)創新延展。
②比色皿架未落位。解決方法:調(diào)整比色皿架使其落位長期間。
③光電轉(zhuǎn)換部分老化基本情況。解決方法:更換部件。
④電路故障高端化。解決方法:調(diào)修電路至關重要。
3) 測量過程中,"100%"點經(jīng)常變動∮蒙狭?？赡茉?
①比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴能力建設。解決方法:用擦鏡紙擦干凈比色皿表面關註，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位無障礙。
②電路故障(電壓連日來、光電接收、放大電路)認為。解決方法:送修系統。
4)數(shù)顯不穩(wěn)≈匾饬x？赡茉?
①預(yù)熱時間不夠交流等。解決方法:延長預(yù)熱時間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態(tài)時規劃，也會工作不穩(wěn))提高。
②光電管內(nèi)的干燥劑失效可以使用，使微電流放大器受潮。解決方法:烘烤電路堅實基礎，并更換或烘烤干燥劑稍有不慎。
③環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大等地、外界強光照射等最為顯著。解決方法:改善工作環(huán)境。
④光電管規定、電路等其它原因環境。解決方法:送修。
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